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懸浮細(xì)胞做好免疫熒光的關(guān)鍵步驟

更新時間:2023-02-17   點擊次數(shù):3803次

您是否希望懸浮細(xì)胞的免疫熒光像貼壁細(xì)胞一樣容易?現(xiàn)在就是這樣!

靶點科技Shi-fix玻片允許懸浮細(xì)胞分層或直接作為單層生長。簡單,無憂的實驗方案,無需離心即可將懸浮細(xì)胞固定到載玻片上。只需將細(xì)胞添加到載玻片上,等待30分鐘,用PBS洗滌未結(jié)合的細(xì)胞并繼續(xù)免疫染色(或繼續(xù)培養(yǎng)以獲得所需的細(xì)胞密度)。

這些玻片也可用于染色懸浮細(xì)胞以進行顯微鏡檢查,或用于固定懸浮細(xì)胞以進行共聚焦顯微鏡檢查。更重要的是,如果需要,您還可以在細(xì)胞附著在玻片上時刺激它們。您可以像貼壁細(xì)胞一樣處理非貼壁細(xì)胞!

關(guān)鍵步驟:

1. 使用PBS清洗細(xì)胞,并將細(xì)胞重新懸浮于PBS中(2-5 百萬個/ml)

2. 把懸浮細(xì)胞專用免疫熒光玻片放置于12孔或者6孔細(xì)胞培養(yǎng)板孔里,直接滴加細(xì)胞于懸浮細(xì)胞專用免疫熒光玻片上(每個玻片上20-30萬個細(xì)胞)

3. 使細(xì)胞附著30分鐘,有些細(xì)胞需要延長附著時間,但不要超過1小時。使用約2ml PBS沖洗掉未結(jié)合細(xì)胞(切勿直接垂直滴加PBS到玻片上細(xì)胞,可將PBS滴加于板孔里側(cè)邊,然后輕輕搖晃3-5分鐘)

4. 在顯微鏡下檢查細(xì)胞附著情況,如果需要進一步培養(yǎng),那么加入1ml培養(yǎng)基即可;若不培養(yǎng)即可直接固定,染色。


四步走,操作示意圖如下:





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